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特定低分子量透明質(zhì)酸制備工藝研究
 2022年12月08日 |閱讀次數(shù):826

一. 特定分子量透明質(zhì)酸制備的工藝優(yōu)缺點

物理法:主要是通過高溫加熱、超聲波破碎和高能射線輻射法等方式解聚HA糖鏈,產(chǎn)物的分子量分布不均一,且效率較低,很難實現(xiàn)HA的徹底降解。

化學(xué)法:通過酸/堿溶液降解HA糖鏈的化學(xué)法,引入的化學(xué)試劑使得產(chǎn)物純化困難,而且化學(xué)法解聚會導(dǎo)致HA的分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。

酶解法:以高分子量HA為底物,使用透明質(zhì)酸酶催化降解的酶解法,反應(yīng)條件溫和、重復(fù)性好、產(chǎn)物分子量均一、分子量大小可控。

傳統(tǒng)酶解法:目前商品化的牛睪丸透明質(zhì)酶依靠動物組織提取生產(chǎn),存在來源受限且雜質(zhì)較多的問題,容易引起免疫反應(yīng);裂解酶引起透明質(zhì)酸結(jié)構(gòu)改變,分子穩(wěn)定性降低。

合成法:無論是化學(xué)合成還是酶法合成制備HA的方法,成本相對較高且效率較低,不適合規(guī)模化生產(chǎn)及應(yīng)用。


二. 重組透明質(zhì)酸酶解法

重組透明質(zhì)酸酶解法優(yōu)勢

公司采用酵母菌表達(dá)的重組透明質(zhì)酸水解酶具有高表達(dá)、高活力、高純度的特點,根據(jù)需要實現(xiàn)了任意低分子量以及超低分子量HA的制備,具有顯著的優(yōu)勢。基于透明質(zhì)酸水解酶制備低分子量HA更適合規(guī)模化生產(chǎn)和推廣應(yīng)用。


三. 工藝流程

1. 重組透明質(zhì)酸水解酶生產(chǎn)菌株發(fā)酵

2. 無菌法提取純化重組HA水解酶

3. 特定條件水解透明質(zhì)酸

4. 微濾技術(shù)去除工藝殘留物質(zhì)

5. 干燥收獲目標(biāo)透明質(zhì)酸水解物

6. 產(chǎn)品質(zhì)量分析

7. 分裝、包裝、入庫


四. 產(chǎn)量分析

年產(chǎn)能:年產(chǎn)100噸生產(chǎn)能力

批規(guī)模:批規(guī)模60kg

精確控制:分子量分布精確控制

特定分子:可制備1000-3000Da、3000-50萬Da范圍的特定分子量透明質(zhì)酸

多元定制:根據(jù)客戶需求,定制不同規(guī)格、不同分子量分布產(chǎn)品

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